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SILAC标记定量

SILAC(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture)是一种细胞培养条件下的稳定同位素标记技术。

 

SILAC技术原理

利用含轻、中或重型同位素标记的必需氨基酸(主要是Lys和Arg)培养基培养细胞,标记细胞内新合成的蛋白质,培养7代以上,细胞中几乎所有蛋白质都被标记。不同处理的蛋白样品等量混合,经胰酶酶解和LC-MS/MS分析即可得到肽段及蛋白的定性和相对定量结果。

SILAC技术实验流程
SILAC技术流程-辉骏生物.png
辉骏生物技术优势

1. 标记效率高:非放射性同位素氨基酸对细胞蛋白质进行体内标记,标记效率几乎可达100%;

2. 定量准确性极高:各组蛋白标记混合,酶解和检测均在同一管中进行,避免了操作误差;

2. 灵敏度高:采用高分辨率的质谱仪检测,低丰度蛋白也能检出。

 

SILAC应用范围

★可传代的哺乳动物细胞样本,培养基为RPMI 1640,DMEM,MEM或F12;如果是特殊培养基请详询400-699-1663。

★样本组别数不超过3组。

SILAC服务信息

项目名称

客户提供

结果交付

实验周期

 



SILAC


已培养7代以上的SILAC标记细胞(同位素培养基由我方提供;如委托我方培养细胞,额外收费)


样本信息表


1、标记测试结果
2、蛋白鉴定及定量结果表
3、肽段鉴定及定量结果表
4、差异蛋白结果表
5、生物信息学分析结果
6、质谱原始数据
7、实验报告

 



8-10


SILAC实验—客户发表文献

1. Gu C.M. et al: Discovery of the Oncogenic Parp1, a Target of bcr-abl and a Potential Therapeutic, in mir-181a/PPFIA1 Signaling Pathway. Molecular Therapy: Nucleic Acids (2019,IF= 5.66).

2. Guo, H.C. et al: Quantitative Proteomic Analysis of BHK-21 Cells Infected with Foot-and-Mouth Disease Virus Serotype Asia 1. PLoS ONE 10(7): e0132384 (2015,IF=3.569).

3. Quantitative Proteomics Using Stable Isotope Labeling with Amino Acids in Cell Culture Reveals Protein and Pathway Regulation in Porcine Circovirus Type 2 Infected PK-15 Cells. J Proteome Res. (2011 , IF=4.173).


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