科研服务

Research Service

DNA pull down

DNA pull down技术原理

先将含脱硫生物素的DNA pulldown探针结合到链霉亲和素Beads上,再将DNA-Beads和细胞裂解液孵育,这样DNA结合蛋白便一起吸附在Beads上。洗涤掉未结合的蛋白后,再用洗脱液将DNA结合蛋白从Beads洗脱下来,得到DNA pull down产物。DNA-protein复合物既可以用WesternBlot检测已知蛋白,也可以用质谱鉴定未知蛋白。


DNA pull down实验流程

DNA pulldown技术服务、dna pulldown WB实验平台、DNA pull-down MS实验.jpg

DNA pull down技术应用

筛选或验证和靶DNA结合的蛋白


DNA pull down实验服务*辉骏优势

1. 近十年服务经验,服务案例众多;

2. 对围绕DNA结合蛋白开展的整体课题提供全方位指导,包括上下游实验设计和结合蛋白的多方法验证等;

3. 自有蛋白质组学平台,对DNA pull down产物这类微量蛋白的质谱鉴定有十足的把控能力,对后续的生物信息分析有独到的见解;

4. 售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿。


DNA pull-down技术服务信息

项目名称

客户提供

结果交付

实验周期

 


DNA pulldown WB

实验样本
DNA片段的基因模板
待验证的蛋白抗体
实验信息表

1、DNA探针电泳图
2、待测蛋白WB检测图
3、结果整理图
4、实验报告

 


3-4周

DNA pulldown MS实验样本
DNA片段的基因模板
实验信息表

1、DNA探针电泳图
2、质谱检测结果
3、生物信息学分析结果
4、实验报告

 6-7周


DNA pulldown 技术参考文献

1. Wang R.H. et al: A requirement for breast-cancer-associated gene 1(BRCA1) in the spindle checkpoint. PANS. 2004,IF=9.58.
【研究内容】:研究表明BRCA1缺陷型细胞的有丝分裂受到影响,存在纺锤体检查点缺陷。作者检测和纺锤体检查点密切相关的几个基因,发现BRCA1缺陷型Mad2基因表达水平变化明显,由此推测BRCA1是通过影响Mad2的表达,从而影响有丝分裂的。DNA pull down及ChIP-qPCR实验证实了BRCA1可以和Mad2启动子结合,进一步研究发现BRCA1确实上调Mad2的表达,从而影响有丝分裂。
使用相关技术:dna pull down检测、DNA-pull down探针、DNA pull down质谱


2. Charles E. Foulds.et al: Proteomic Analysis of Coregulators Bound to ERα on DNA and Nucleosomes Reveals Coregulator Dynamics.Mol Cell.2013,IF=15.584.
【研究内容】:转录辅助调节因子(COR)在基因的激活或抑制中起着核心作用,研究者使用生物素-DNA pull down实验和IP结合质谱分析的方法,鉴定与E2配体ERα结合的协同调节子,提取出至少17个转录辅助调节因子。研究发现组蛋白H3K4三甲基标记(H3K4me3)刺激ERα介导转录的机制;H3K4me3模板在ATP和AcCoA存在的情况下促进特定的COR动力学。
使用相关技术DNA pulldown技术服务、DNA pulldown WB、DNA pulldown MS实验



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