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荧光定量PCR (qPCR)

实时荧光定量PCR(qPCR)是对基因进行相对或绝对定量的实验方法。本公司可提供基于SYBR Green染料法的荧光定量PCR服务。

 

荧光定量PCR(qPCR)技术原理

在PCR反应体系中加入荧光基团,随着PCR循环数的递增,PCR产物不断积累,荧光信号也会相应的增加,这样就可以通过荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。在PCR扩增的指数时期,模板的CT值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。

荧光定量PCR扩增曲线.jpg

辉骏生物技术优势

1.实时监测:通过扩增曲线能够实时监测PCR产物的积累。

2.特异性强:实验完成后,溶解曲线的分析可以验证扩增产物的特异性,降低假阳性。

3.精确定量:利用扩增进入指数增长期的CT值来定量测定起始模板量,从而实现了极为精确的核酸定量检测。

荧光定量PCR技术优势-辉骏生物.jpg


荧光定量PCR服务流程

1.引物设计与合成

2.基因模板制备:RNA提取和反转录,或DNA提取;

3.qPCR预实验:检测目的基因和内参基因的扩增情况;

4.qPCR正式实验:全部样本做qPCR,每个样本设置三复孔;确定样本扩增产物单一,内参基因CT值正常;

5.  数据分析和出具报告:按照客户要求计算样本间的目的基因表达差异,并作柱形图。

 

荧光定量PCR服务信息

项目名称

客户提供

结果交付

实验周期

荧光定量PCR原始样本(干冰运输,广州地区可上门取样)
实验信息表(样本信息,待测基因序列,内参要求等)

1、qPCR原始数据
2、扩增曲线和溶解曲线
3、定量分析数据
4、实验报告

2-4周


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