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DIGE(2D-DIGE)实验技术服务

蛋白质组学年终大促销,双向电泳,CO-IP,iTRAQ,SILAC,DIGE等技术服务全场85折起,还有机会拿走终极大礼iPhone6哦~   

一、DIGE概述
         DIGE(双向荧光差异凝胶电泳,Two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis,2D-DIGE),是在
传统双向电泳的基础上发展而来的新型蛋白质组学定量技术,其分离蛋白的基本过程与传统双向电泳一致。但DIGE使用三种荧光染料(Cy2, Cy3和Cy5)标记不同组别的蛋白,并在同一张凝胶上对标记好的三组蛋白混合物进行电泳分离,是一种多通道分离技术。通常情况下,Cy3和Cy5分别标记两组蛋白;Cy2标记所有组别蛋白的混合物,作为内参使用。电泳分离后,在激光扫描仪中分别用相应波长的激光进行扫描,这样在同一张凝胶中便可得到三组蛋白的图谱。凝胶扫描后,用专用软件进行分析对比,运用特殊算法,给出准确可靠的定量信息。DIGE在实验中引入内参,有效地改善了实验的重复性,大大提高了定量的准确性。

 

二、与传统双向电泳(银染或考染胶)相比,DIGE技术服务具有以下优势:

 1、灵敏度高,最低可检测到125pg的蛋白质;
 2、高效性,同一块凝胶上可以电泳两个样品,减轻了工作量;      
 3、线性范围更广,动态范围高达10-5;      
 4、定量精确, 采用内标消除了凝胶与凝胶之间的实验误差,显著提高了实验的精确度和可重复性。
 5、统计学分析,ImageMaster7.0(DIGE)软件自动分析,得到统计结果,降低了操作者之间的偏差。

 

三、DIGE技术服务流程


 
 

    图1:DIGE技术服务流程图. 1、样品准备:提取对照组和不同实验组的蛋白质,定量,Cy3Cy5标记蛋白,同时将所有实验组与对照组的样品等量混合后Cy2标记,作为内标。2、蛋白质分离:等量混合三种荧光素标记后的蛋白质,2D-PAGE电泳分离,荧光扫描。3、蛋白质定量分析:ImageMaster 7.0(DIGE)分析同一蛋白质不同处理后的表达量变化。

 

四、DIGE技术服务内容
  1、样本制备与定量;
  2、荧光标记;

  3、双向电泳和图片分析;
 4、DIGE实验报告提交。

 

、送样须知:
  1、技术咨询:在您开展实验之前,本公司将为您竭诚提供最有效的DIGE技术服务方案。
  2、为了保证DIGE实验能顺利进行,样品寄送需满足以下要求:
    基本要求:由于DIGE荧光染料试剂可以标记任何类型的样本,如组织、细胞、细菌等材料。因此本公司接受任何类型的样本,对于不同的样本需要的量有 所不同,具体需要量请咨询本公司。
    运输要求:液氮或干冰保存寄送,广州本地客户可上门收样。
    注:样本应避免各类污染和反复冻融。

 

、实验服务报告内容
  1、DIGE荧光电子图片;       
  2、蛋白质点定量分析结果,包括差异点号码、差异倍数、pIMW等;       
  3、完整实验报告,包括实验步骤、使用试剂、仪器、软件检索参数等。

 

七、DIGE实验服务案例

 

 
 

    图2:DIGE定量分析结果。蛋白质样品经过荧光染料标记后双向电泳ImageMaster7.0 (DIGE)分析差异点结果。

 

、实验服务周期及收费标准:咨询本公司

 

九、质量承诺:
  1、Cy2作为内标,确保定量的准确;
  2、提供客观的DIGE实验分析结果。

 

十、欢迎索取顾客在辉骏生物做的DIGE技术服务所发表的样板文章。
查看部分客户发表SCI论文

 


 

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