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SILAC标记定量蛋白质组学

一、SILAC概述
     细胞培养条件下稳定同位素标记技术(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture,SILAC),利用含轻、中或重型同位素标记的必需氨基酸(主要是Lys和Arg)培养基培养细胞,来标记细胞内新合成的蛋白质,一般培养5-6代,细胞中的蛋白质将都被同位素标记。不同处理的蛋白样品等量混合,经SDS-PAGE分离,切胶,酶消化,LC-MS/MS分析即可得到有关蛋白的定量及定性结果。
     SILAC在比较蛋白质组学,蛋白与蛋白互作,蛋白与DNA互作,蛋白与RNA互作等研究领域均有广泛应用。



二、与体外标记技术相比,SILAC有以下优势
1、高通量,可同时标记细胞内的蛋白,与质谱联用可同时分析鉴定多种蛋白;
2、同位素标记效率高、稳定,不受裂解液影响,结果重复性好,可信度高;
3、灵敏度高,实验所需蛋白量明显减少;
4、体内标记,结果更接近真实生理状态。


 

三、SILAC技术服务流程

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图1:SILAC技术服务流程。


 

四、SILAC技术服务内容
1、细胞同位素标记;(本公司出售L、M和H型同位素Lys和Arg)
2、样本制备与定量
3、SDS-PAGE分离;
4、胰酶酶切、LC-MS/MS分析
5、蛋白质定性及定量分析;
6、差异蛋白的生物信息学分析
7、实验报告整理。


 

五、送样须知
1、方案咨询:不同的实验目的,需设计不同的SILAC实验方案,具体请咨询我司。
2、SILAC适用:能标记活的可传代细胞、细菌等材料,不能标记组织、体液等样本,详情请咨询我司。


 

六、实验服务报告内容
 
1、蛋白定鉴定和SILAC定量分析结果;  
  2 、顾客指定蛋白质对应的质谱峰图;  
  3、SILAC实验完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。



七、实验周期及收费标准:请咨询我司4006991663

 

八、质量承诺
 1、严谨的SILAC技术服务方案确保定量分析结果可靠;
 2、提供客观的SILAC实验分析结果。

 

九、欢迎索取顾客在辉骏生物提供的SILAC技术服务所发表的样板文章。
查看部分客户发表SCI论文

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