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载体构建与改造实验技术服务
载体构建与改造的基本实验步骤包括目的DNA片段制备和载体的制备或改造,载体与克隆片段连接和转化,阳性克隆筛选,根据载体和克隆片段的不同要求,可实现基因突变,病毒载体的构建等技术服务。
microRNA表达载体构建实验技术服务
microRNA(miRNA)表达载体构建实验技术服务主要将pre-miRNA序列插入到表达载体的启动子后面,在细胞中转录出pre-miRNA后进一步被加工成microRNA,microRNA与其靶基因的mRNA相互作用从而抑制其靶基因表达。
RT-PCR实验技术服务
反转录RCR(RT-PCR)实验技术服务主要包括引物设计,RNA提取,反转录和PCR。提取RNA后,以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物进行反转录。然后以基因特异性的引物进行PCR,电泳分析目的条带的灰度值,进而判断目的基因mRNA转录水平的相对变化量。
siRNA载体构建实验服务
siRNA表达载体构建实验技术服务主要包括引物设计与外源基因克隆,将表达siRNA的双链DNA插入到启动子下面,导入细胞后表达siRNA,依据表达载体的不同,可分为siRNA质粒表达载体和siRNA病毒表达载体,siRNA病毒表达载体可以感染常规转染效率比较低的细胞。
荧光定量PCR(qPCR)实验技术服务
荧光定量PCR(实时定量PCR,qPCR)实验步骤主要包括荧光定量PCR引物设计,荧光定量PCR,实验结果分析。目前,根据检测原理不同可分SYBR Green,TaqMan探针法等方法。通过对DNA或RNA的荧光定量PCR监测, 实现基因的相对定量、绝对定量和定性分析。
基因调取、合成(cDNA克隆)
一、服务简介 (1)基因调取和基因合成 A. 基因调取:从细胞或组织中提取总DNA或总RNA后扩增出目的基因; B. 全基因合成:通过化学合成的方法获得目的DNA序列。 基因调取价格较低,但容易出现SNP,基因合成准确性很高,但价格稍高。 (2)定点突变 定点突变是指通过 聚
定点突变
一、服务简介 定点突变 定点突变是指通过 聚合酶链式反应 (PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化,包括碱基的添加、删除、突变等。 定点突变常用于探索调控区(如启动子等)的关键位点,以及研究蛋白质结构与功能之间的关系。 二、
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