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RIP

一、技术概述
        RIP是研究体内蛋白与RNA互作的重要技术。该技术先用甲醛等试剂交联细胞内的“蛋白-RNA”互作复合物，裂解细胞后，用靶蛋白特异的抗体（或标签抗体）做免疫沉淀，获得“靶蛋白-RNA”互作复合物，去交联分离其中的RNA；针对预测的靶蛋白结合RNA的序列设计引物，做qPCR实验，验证预测的RNA是否与靶蛋白有结合；或者将分离出来的RNA做高通量测序，筛选到可能与靶蛋白结合的RNA。

二、技术应用
        目的蛋白的互作RNA筛选。

三、技术流程
        细胞交联→细胞裂解→免疫共沉淀→去交联→RNA分离→建库→高通量测序（或qPCR）。

四、服务信息

项目名称	客户提供	结果交付
RIP-qPCR	1. 蛋白信息（物种、序列） 2. 蛋白抗体 3. 细胞系及培养信息 4. 待验证的基因信息（物种、序列）	1. 原始结果图（包括Input、阳性及阴性对照结果） 2. qPCR结果； 3. 完整实验报告（包括实验材料、方法、结果分析）
RIP-seq	1. 蛋白信息（物种、序列） 2. 蛋白抗体 3. 细胞系及培养信息	1. 原始结果图（input和洗脱液的SDS-PAGE图） 2. 高通量测序结果 3. 完整实验报告（包括实验材料、方法、结果分析）

五、参考文献
        1.RIP: RNA Immunoprecipitation. Methods MolBiol 1480:73-86 (2016).
        2.Mitochondrial iron chelation ameliorates cigarette smoke-induced bronchitis and emphysema in mice. Nat Med 22(2):163-174(2016).
        3.Identification and dynamic changes of RNAs isolated from RALY-containing ribonucleoprotein complexes. Nucleic Acids Res(2017).

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