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蛋白质定性:质谱鉴定(LC-MS/MS)

技术简介:
        蛋白质定性通常采用质谱分析结合数据库检索的方法,所分析的样本可以是蛋白质溶液、蛋白质胶条或胶点。
        除简单蛋白样本(如双向电泳斑点或纯化蛋白)常采用MALDI-TOF/TOF质谱进行分析之外,目前客户提供的样本多为混合蛋白,例如蛋白溶液,或SDS-PAGE条带,这些样本都可以采用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术进行分析。


应用领域:
        亚细胞组分的全谱分析,IP、co-IP、Pull-down后的互作蛋白鉴定,或其他中等复杂蛋白样本的鉴定。


技术流程:
        蛋白胶条/混合液样本——蛋白酶解——液质联用分析——数据库检索——蛋白质鉴定结果


技术优点:
        1. 采用高效液相色谱和质谱联用的分析方法,可以一次性鉴定成百上千种蛋白质。
        2. 鉴定准确性和灵敏度高。


参考文献:
        1.Modulation of deregulated chaperone-mediated autophagy by a phosphopeptide.Autophagy.11(3):472-86(2015).
        2.Identification of a novel mitochondrial interacting protein of C1QBP using subcellular fractionation coupled with CoIP-MS.Anal Bioanal Chem. 408(6):1557-64(2016).
        3.Systems Biology Reveals NS4B-Cyclophilin A Interaction: A New Target to Inhibit YFV Replication. J Proteome Res. 16(4):1542-1555(2017).
        4.The important functionality of 14-3-3 isoforms in rice roots revealed by affinity chromatography.J Proteomics. 31;158:20-30(2017).

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