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鉴定蛋白该用一级质谱Or二级质谱?
蛋白质组问题之:一级质谱和二级质谱的选择。 辉骏生物在以往实验中,遇到很多做 双向电泳 的朋友在选择2-DE的差异点做质谱的时候经常会遇到一级质谱和二级质谱的选择的问题, 常规的一级 质谱鉴定 ,指通过一次质谱测定某个蛋白所有酶解片段的精确质量信息并对库检索
双向电泳实验7大常见问题答疑
辉骏生物总结了以下7点关于双向电泳实验答疑,希望对要做双向电泳实验的同学带来帮助! Q1:凝胶的蛋白鉴定一般需要多少量的蛋白? A:现代质谱和色谱仪的检测灵敏度都是非常高的,只要肉眼能清晰可见(包括银染的点)的蛋白点都可足够进行蛋白鉴定,但是蛋白取点的
质谱鉴定凝胶取点注意事项
辉骏生物总结的关于凝胶取点的注意实现,觉得比较全面和详细,期望对即将要做质谱的同学有用! 1,取点的时候最怕有皮屑等人体角质蛋白污染,所以,首先,第一点需要注意的是带口罩、手套、可以的话,还把头罩也带上,如果不带头罩的话,取点的时候,头不要刚好位于凝胶
如何成功验证mirRNA靶基因?
大家在前期调研中是否经常遇到这些问题: 1、通过各种在线软件进行预测获得 miRNA 靶向基因 ,但对 miRNA 靶基因的实际作用不清楚。 2、预测到转录因子对基因的表达起抑制或增强的作用,而具体活性以及结合位点仍然需验证。 3、未知 lncRNA 或者 circRNA 吸附 miRNA 效
核酸标记技术介绍
一般来说,有两种类型的核酸标记技术:放射性同位素标记和非放射性标记。 1.放射性同位素标记:被认为是一种传统的核酸标记方法,利用ATP-- 32 P or 35 P合成放射性标记的核苷酸,它们很容易被并入核酸序列,通过传统的酶法或者生物体。 放射性核苷酸于1935年首次被乔
做分离纯化实验要如何选择凝胶填料?
做分离纯化工作的实验人员都苦恼该如何选择合适的填料是至关重要的。通过优化组合找到高效的纯化工艺,使用最少的步骤达到蛋白质产量和纯度的最大化。辉骏生物带你介绍以下填料选择方法: 1、测定-分子量、PI 当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时,可用PAGE
简析:免疫共沉淀(Co-IP)与免疫沉淀(IP)的区别
免疫共沉淀(Co-IP) Co-IP 是免疫沉淀的延伸,主要用于蛋白-蛋白相互作用检测。Co-IP的原理是基于IP反应捕获和纯化靶蛋白,如果样品溶液中存在与靶蛋白相互作用的目的蛋白,也会被一同捕获及纯化得到,随后利用SDS-PAGE, Western Blot 等手段对得到的目标蛋白进行分
重组腺病毒有何优点?
1 、宿主范围广,对人致病性低 这套腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。 腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋 白。 2、 在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因 逆转录病毒只能感染增殖性细胞,因此 DNA 转
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