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iTRAQ技术揭示膜蛋白质参与了肿瘤的迁移和侵袭

摘要:多形性胶质母细胞瘤预后不良,病人的平均存活率在12-14个月之间。这种肿瘤的特征是细胞生长快、广泛的肿瘤血管生成,以及正常脑结构的细胞浸润扩散。本文在动物实验中建立了一种人类胶质母细胞瘤模型,研究两种特性人类胶质母细胞瘤的表型。本文的目的是鉴定在非血管生成和血管生成表型上表达的潜在生物标志,并且阐明由浸润到血管生成转变的过程中的分子途径。通过连续移植胶质瘤细胞到裸鼠中,分析了瘤细胞由一种浸润型到血管生成表型的过程中蛋白表达的变化,主要集中在膜相关蛋白的变化。应用iTRAQ实验技术并结合二维液相色谱实验技术和MALDI-TOF/TOF质谱实验技术,在膜富集的部分,鉴别了几千个蛋白,其中1460种蛋白被抽提。这些数据通过广泛的生物信息学技术、异种移植瘤芯片实验技术和临床神经胶质瘤组织芯片实验技术进一步证实。总的来说,本文通过iTRAQ蛋白表达谱技术发现了在浸润型到血管生成脑瘤型的过程中的变化,经过鉴定的蛋白进一步可开发作为生物标志物或者恶性胶质瘤的治疗靶点。


实验技术方法:本文构建了胶质母细胞瘤的细胞模型-高浸润型胶质瘤细胞和可以发展为高血管生成型胶质瘤的动物模型,通过iTRAQ实验技术分析了胶质瘤细胞由浸润型到高血管生成型变化的过程中蛋白质组的表达变化,并通过二维色谱实验技术和MALDI-TOF/TOF质谱实验技术鉴别几千个蛋白,这些蛋白进一步通过western实验技术、免疫组化实验、生物芯片技术证实,发现了在肿瘤发展过程中相关分子的变化谱。说明iTRAQ实验技术在研究肿瘤发展过程中具有较高的准确性和精确性,对于发现新的肿瘤标志物和治疗靶点有重要意义。


意义:本文用iTRAQ实验技术研究肿瘤发生过程中蛋白质组的表达变化谱,这些筛查鉴定的蛋白可以开发为生物标志物或者是肿瘤治疗的靶点。


文献来源:August 11,2009 Molecular & Cellular Proteomics 8.11 2595-2612.
 

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