货号 | 规格 | 货期 | 价格 |
FI88707 | 10次 | 现货 | |
FI88708 | 20次 | 现货 |
RNA免疫共沉淀(RIP)是采用特异性抗体来调取内源性RNA结合蛋白及其结合RNA的技术。辉骏生物公司开发的RIP试剂盒利用特殊优化的树脂来捕获“抗体-RNA结合蛋白-RNA”复合体,漂洗去除未结合的RNA后,采用特殊洗脱液将蛋白和RNA从树脂上分离出来,分离出的蛋白可以进行western-blot检测调取效果,而提取纯化的RNA可以利用qPCR(RIP-qPCR)或利用高通量测序(RIP-Seq)方法来检测。
RNA结合蛋白(RBPs)是可以与RNA结合的蛋白质,参与调控了RNA的众多生物学过程。可以说,没有RBPs,RNA几乎寸步难行。RIP技术主要应用于验证或寻找与已知RBP结合的RNA。以下列举了可应用RIP试剂盒的几个研究方向:
1. RBPs功能研究,如活性调控、定位等;
2. RBPs调控的RNA功能研究,如合成、可变剪切、修饰、转运、定位、稳定性和翻译等。
RIP实验试剂盒 * 辉骏生物产品优势
1、特殊优化的树脂与抗体亲和效率高,抗体用量少;
2、优化的裂解液体系适用于各类样本(动物细胞/组织、植物、微生物);
3、操作简便,周期短,适合初学者。
4、品质好,实验结果稳定。
试剂名称 | 体积 | 保存条件 |
树脂 | 800 μL | 4 ℃ |
裂解缓冲液 | 50 mL | 4 ℃ |
洗脱缓冲液 | 1.2 mL | 4 ℃ |
1. 裂解样本;
2. 样本裂解液与目标蛋白抗体孵育;
3. 加入树脂,捕获“抗体-RNA结合蛋白-RNA”复合体;
4. 漂洗、洗脱得到“RNA结合蛋白-RNA“复合体;
5. 提取纯化RNA,进行下游qPCR或seq检测。
1. 实验设计:分别采用RNA结合蛋白A抗体和IgG进行RIP实验,检测蛋白A是否和X基因结合(以GAPDH基因做对照)。
RNA结合蛋白A的western-blot图
待测RNA(X基因)的qPCR检测图(阳性结果)
![]() | 1. Bao X.C. et al: Capturing the interactome of newly transcribed RNA.Nature Methods,15(3): 213–220. 2018,IF=28.467. |
![]() | 【研究内容】:客户利用RNA pull down、CoIP等技术,发现lincRNA-p21与HNRNPK结合,并和甲基化酶SETDB1、DNMT1形成复合物,作者通过RIP-qPCR进一步证实了细胞中存在该复合物。该复合物甲基化了多能性基因的启动子序列及相应组蛋白,并改变了它们的表达量,从而进一步影响体细胞重编程过程。 使用相关技术:RIP seq、RNA结合蛋白免疫共沉淀rip qpcr、质谱鉴定 |
![]() | 3. Zhang C Y . et al: CircVPRBP inhibits nodal metastasis of cervical cancer by impeding RACK1 O-GlcNAcylation and stability. Oncogene. 2023, IF=8.756. 【研究内容】:淋巴结转移是宫颈癌(CCa)患者最恶性的临床特征之一。本研究利用RNA pull down MS、RIP-qPCR和Co-IP等实验发现:circVPRBP与OGT酶竞争结合RACK1蛋白,阻碍RACK1-S122位点的O-GlcNAc修饰来使其降解,从而抑制宫颈癌淋巴结转移和淋巴管生成。 使用相关技术:RIP-qPCR、RNA pull down MS、免疫共沉淀Co-IP、质谱鉴定 |
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