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RIP试剂盒


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RNA免疫共沉淀试剂盒RIP试剂盒)* 产品简介


RNA免疫共沉淀(RIP)是采用特异性抗体来调取内源性RNA结合蛋白及其结合RNA的技术。辉骏生物公司开发的RIP试剂盒利用特殊优化的树脂来捕获“抗体-RNA结合蛋白-RNA”复合体,漂洗去除未结合的RNA后,采用特殊洗脱液将蛋白和RNA从树脂上分离出来,分离出的蛋白可以进行western-blot检测调取效果,而提取纯化的RNA可以利用qPCR(RIP-qPCR)或利用高通量测序(RIP-Seq)方法来检测。




RIP试剂盒 * 产品应用


RNA结合蛋白(RBPs)是可以与RNA结合的蛋白质,参与调控了RNA的众多生物学过程。可以说,没有RBPs,RNA几乎寸步难行。RIP技术主要应用于验证或寻找与已知RBP结合的RNA。以下列举了可应用RIP试剂盒的几个研究方向:

1. RBPs功能研究,如活性调控、定位等;

2. RBPs调控的RNA功能研究,如合成、可变剪切、修饰、转运、定位、稳定性和翻译等。




RIP实验试剂盒 * 辉骏生物产品优势


1、特殊优化的树脂与抗体亲和效率高,抗体用量少;

2、优化的裂解液体系适用于各类样本(动物细胞/组织、植物、微生物);

3、操作简便,周期短,适合初学者。

4、品质好,实验结果稳定。

5、洗脱液适配后续qPCR和高通量测序实验。
RIP试剂盒(rna免疫共沉淀试剂盒)-辉骏生物-价格低大量现货.png




RIP试剂盒 * 组分(10次)


 试剂名称 体积 保存条件
 树脂 800 μL 4 ℃
 裂解缓冲液 50 mL 4 ℃
 洗脱缓冲液 1.2 mL 4




RIP 实验检测试剂盒 * 使用流程简述


1. 裂解样本;

2. 样本裂解液与目标蛋白抗体孵育;

3. 加入树脂,捕获“抗体-RNA结合蛋白-RNA”复合体;

4. 漂洗、洗脱得到“RNA结合蛋白-RNA“复合体;

5. 提取纯化RNA,进行下游qPCR或seq检测。





RIP试剂盒 * 使用案例


1. 实验设计:分别采用RNA结合蛋白A抗体和IgG进行RIP实验,检测蛋白A是否和X基因结合(以GAPDH基因做对照)。

RIP结果jpg.jpg

RNA结合蛋白A的western-blot图


qPCR.jpg


待测RNA(X基因)的qPCR检测图(阳性结果)



RIP试剂盒 * 客户文章


1. Bao X.C. et al: Capturing the interactome of newly transcribed RNA.Nature Methods,15(3): 213–220. 2018,IF=28.467.
【研究内容】:辉骏生物为作者单位之一,和作者共同开发了一种捕获鉴定新生RNA结合蛋白的全新方法(RICK)。该方法用EU标记新生RNA,通过点击反应-生物素-链霉亲和素系统结合质谱分析,分离鉴定RNA互作蛋白。其中,METTL1和CDK1是两个RICK独有的RNA结合蛋白。 RIP-qPCR、RIP-Seq、CLIP-Seq等实验进一步证实了它们与非PolyA RNA的结合,这种结合在细胞分化与增殖中发挥了重要作用。
使用相关技术RIP-qPCR、RNA免疫共沉淀RIP-Seq、RNA结合蛋白免疫沉淀技术


2. Bao. X.C. et al: The p53-induced lincRNA-p21 derails somatic cell reprogramming by sustaining H3K9me3 and CpG methylation at pluripotency gene promoters. Cell Research.2015, IF=13.9.

【研究内容】:客户利用RNA pull down、CoIP等技术,发现lincRNA-p21与HNRNPK结合,并和甲基化酶SETDB1、DNMT1形成复合物,作者通过RIP-qPCR进一步证实了细胞中存在该复合物。该复合物甲基化了多能性基因的启动子序列及相应组蛋白,并改变了它们的表达量,从而进一步影响体细胞重编程过程。

使用相关技术RIP seq、RNA结合蛋白疫共沉淀rip qpcr、质谱鉴定


3. Zhang C Y . et al: CircVPRBP inhibits nodal metastasis of cervical cancer by impeding RACK1 O-GlcNAcylation and stability. Oncogene. 2023, IF=8.756.

【研究内容】:淋巴结转移是宫颈癌(CCa)患者最恶性的临床特征之一。本研究利用RNA pull down MS、RIP-qPCR和Co-IP等实验发现:circVPRBP与OGT酶竞争结合RACK1蛋白,阻碍RACK1-S122位点的O-GlcNAc修饰来使其降解,从而抑制宫颈癌淋巴结转移和淋巴管生成。

使用相关技术:RIP-qPCR、RNA pull down MS、免疫共沉淀Co-IP、质谱鉴定



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