无论药物研发还是基础科研,检测化合物(如小分子药物)与蛋白质之间的相互作用都是一类重要的实验。化合物pull down是体外研究化合物与蛋白质相互作用的方法。利用生物素与链霉亲和素之间的高亲和力,可以从各种类型目标样本中调取目标化合物的结合蛋白。
生物素标记的化合物先与链霉亲和素磁珠孵育,之后与样本蛋白液孵育,目标化合物及其结合蛋白便一起吸附在磁珠上。洗涤去掉未结合的蛋白后,用洗脱液将结合蛋白从磁珠上洗脱下来,之后可以采用Western Blot技术检测特定的结合蛋白,还可以采用质谱方法鉴定与目标化合物结合的未知蛋白。
服务项目 | 服务内容 | 结果交付 | 实验周期 | 客户提供 | 价格 |
化合物 pull down WB (验证型) | Western blot检测样本中的待测蛋白 | Western blot检测图 | 4-5周 | 实验样本 生物素标记的化合物和单生物素对照 待测蛋白抗体 实验信息表 | |
pull-down捕获生物素标记化合物及其结合蛋白 | Western blot检测图 pulldown实验报告 | ||||
化合物 pull down MS (筛选型) | pulldown捕获生物素标记化合物及其结合蛋白 | SDS-PAGE银染检测图 pull-down实验报告 | 6-7周 | 实验样本 生物素标记的化合物和单生物素对照 实验信息表 | |
LC-MS/MS检测及数据分析 | 质谱检索结果及报告 互作蛋白筛选表格 生信分析结果和报告 |
样本类型 | 化合物pull down WB建议送样量 | 化合物pull down MS建议送样量 |
动物细胞 | 3*10e7个细胞/组(约3个10cm皿) | 5*10e7个细胞/组(约5个10cm皿) |
动物组织 | 1g/组 | 2g/组 |
植物叶片 | 2g/组 | 4g/组 |
植物根或果实 | 4g/组 | 8g/组 |
菌体 | 50ul菌体沉淀/组 | 100ul菌体沉淀/组 |
▲注意:以上均为每组样本的送样量,如果实验和对照组用的样本一致,此样本量*2。详细送样指南可联系辉骏生物索取。
保存及运输:-80℃保存,干冰取样/运输,至少在送样前2天通知我司。
药物Pull down MS产物银染图
药物Pull down MS质谱检索表格(部分展示)
潜在结合蛋白的生物信息学分析结果(部分展示)
Chen X. et al: Celastrol induces ROS-mediated apoptosis via directly targeting peroxiredoxin-2 in gastric cancer cells. Theranostics. 2020.
使用相关技术:RNA pull down MS、小分子pull down、化合物pull down、药物pull down
❸ 载体构建实验服务
❹ miRNA靶基因验证
❺ 慢病毒包装
❷ 人cDNA克隆库
❸ 慢病毒表达载体
❹ 慢病毒干扰载体
❷ 抗体从头测序
❸ 抗体表达服务
❹ 重组抗体表达
❸ COIP 试剂盒
❹ Flag 试剂盒
辉骏实力
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