ChainFree^®系列标签抗体RIP试剂盒简介

RIP（RNA免疫共沉淀）技术以感兴趣的蛋白质为中心，寻找与该蛋白质结合的RNA。利用特异性的抗体磁珠捕获生物样本表达的目标蛋白，进而将与目标蛋白结合的RNA也一起捕获，之后可以通过qPCR检测预测的结合RNA，还可以通过测序技术来筛选未知的结合RNA。

DNA重组技术使目标蛋白带上特定标签，再采用标签抗体来检测或富集表达的融合蛋白，为科学研究带来了极大便利。常见的蛋白表位标签有Flag、HA、V5等，这些标签分子量小，对融合蛋白的活性和细胞内定位几乎没有影响。常用的荧光标签包括GFP和RFP，与蛋白融合表达后，可以用于蛋白示踪和表达检测。

在RIP实验中，如果诱饵蛋白携带标签，可以根据标签的不同选择配套的ChainFree® RIP试剂盒。辉骏生物开发了针对植物和动物样本的5款ChainFree^®标签RIP试剂盒，该系列试剂盒采用了优化并重组表达的、无轻重链的标签抗体磁珠进行RIP实验。IP复合物无论采用非变性洗脱还是变性洗脱，均不会出现抗体的轻、重链污染问题。

产品名称	识别的标签序列	磁珠偶联抗体
ChainFree^® Anti-Flag RIP试剂盒	DYKDDDDK	优化并重组表达的无轻、重链的Flag抗体
ChainFree^® Anti-HA RIP试剂盒	YPYDVPDYA	优化并重组表达的无轻、重链的HA抗体
ChainFree^® Anti-V5 RIP试剂盒	GKPIPNPLLGLDST	优化并重组表达的无轻、重链的V5抗体
ChainFree^® Anti-GFP RIP试剂盒	绿色荧光蛋白（GFP或EGFP）	优化并重组表达的无轻、重链的GFP抗体
ChainFree^® Anti-RFP RIP试剂盒	红色荧光蛋白（mCherry等）	优化并重组表达的无轻、重链的RFP抗体

RIP试剂盒的应用方向

RNA结合蛋白（RNA binding protein，RBP）是一类功能强大而广泛的调节因子，约占细胞编码的所有蛋白的5%~10%。目前除了少数RNA以核酶形式单独发挥功能，大部分RNA通过与蛋白结合形成RNA-蛋白复合物来发挥作用。

一方面，RBP参与RNA合成、可变剪接、修饰、转运、翻译及胞内定位等多个转录后调控过程，调控mRNA稳定性、lncRNA活性、miRNA沉默复合体形成等生物学过程；另一方面，RNA也会调节这些蛋白质的活性、定位或与其他蛋白质的相互作用，从而影响RBP介导的各种细胞事件。RNA与蛋白质的相互作用对于维持细胞稳态是非常重要的，干扰这种相互作用将会导致细胞功能失调和相关疾病的发生。

ChainFree^®系列RIP试剂盒-辉骏生物产品优势

1、无抗体轻重链污染：IP复合物无论采用非变性洗脱还是变性洗脱，均不会出现抗体的轻、重链污染问题。

2、亲和力强：低nM级别亲和力，轻松应对低拷贝基因，或难转染细胞系。

3、特异性强：抗体磁珠通过了20株以上的空白细胞系检测，不易产生非特异吸附。

4、结合量高：每10 µL抗体磁珠可结合约15 µg重组蛋白。

5、兼容性好：无论标签在诱饵蛋白的N端或C端，都可以识别。

6、稳定性好：通过了45℃高温测试。