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WB及IP样品制备技巧
在 WB 和 IP实验中,破碎细胞或组织与选择和配制裂解液一样重要。比起一些更软的组织(如脑组织),在准备 WB 或 IP 的样品时,紧密的纤维组织(如肌肉组织)需要更剧烈的方法;对于培养的原代细胞或细胞系,在准备 WB 和 IP 的样品时需要一定的机械搅拌去提取蛋白。机
蛋白纯化His-tag介绍
1、何为His-tag? His-tag单抗又叫6*His-tag单抗,或6*His单克隆抗体,用小鼠制备,His可被镍柱吸附,用于纯化重组蛋白,无论表达的蛋白是可溶的或者包涵体都可以用固定金属离子亲和层析(IMAC)纯化。金属螯合亲合层析,又称固定化金属离子亲合层析(Immobilized meta
质粒提取实验:碱裂解法提取方案
质粒是存在于细菌染色体外的一个或多个能独立复制并稳定遗传的小型环状双链DNA分子,其分子量一般在0.2-10KD范围内。由于质粒分子小,便于分离和提取,可以携带目的基因进入细菌、动物细胞或植物体内进行扩增与表达。 质粒提取方法即去除RNA,将质粒与细菌基因组DNA分开
多重连接依赖式探针扩增(MLPA)技术
多重连接探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)是MRC-Holland在2002年开发的一种分子技术。它是一种灵敏的技术,可以快速有效地定量核酸序列。它在世界各地的许多实验室进行,可用于检测基因的拷贝数变化(如缺失或复制),识别DNA的甲基化
Cell&Nature:血清素相关研究最新进展
血清素,是一种受到最广泛研究的神经递质,最早从血清中发现,又名5-羟色胺,广泛存在于哺乳动物组织中,特别在大脑皮层质及神经突触内含量很高。它是一种能产生愉悦情绪的信使,几乎影响到大脑活动的每一个方面,从调节情绪、精力、记忆力到塑造人生观。很多健康问题
蛋白质组学研究,五大取样原则
在进行蛋白质组学研究时,有五大取样原则,其中代表性原则最为重要,取样的代表性关系到实验结果是否具有科学意义,因此在选择样品时应该根据研究目的慎重选择样品类型。经常有人吐槽血液、血浆、血清傻傻分不清楚,叶片、根茎不知如何选择?不要慌,辉骏生物向你介绍
做分离纯化实验要如何选择凝胶填料?
做分离纯化工作的实验人员都苦恼该如何选择合适的填料是至关重要的。通过优化组合找到高效的纯化工艺,使用最少的步骤达到蛋白质产量和纯度的最大化。辉骏生物带你介绍以下填料选择方法: 1、测定-分子量、PI 当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时,可用PAGE
学术文献检索网站GeenMedical
sci-hub网址经常变更,能否继续运行也是问题,而PubMed是目前国际上公认的检索生物医学文献的权威性数据库,但是大陆地区访问PubMed速度又太慢。查找文献都心累,检索文献效率太慢。那怎么办? 今天小编给大家带来一款神器GeenMedical,作为PubMed本地化的又一平台,它
外泌体及其蛋白质组学研究
外泌体都有哪些分离提取方法? 对于外泌体研究,分离和收集外泌体是非常关键的一步。目前对于外泌体收集有:超高速离心、密度梯度离心、磁珠免疫、超滤法、聚合物沉淀等几种主要方法,各种方法均存在不同优缺点。 怎么知道提取的外泌体合不合格? 鉴定外泌体提取合格与
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