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ChIP实验如何设置对照及重复?

通常ChIP过程产生3份DNA产物,Input、IgG产物、IP产物。Input是染色质片段化后提取获得的总DNA、未经抗体加入免疫沉淀过程,IgG组这是用实验抗体的同型阴性对照抗体、作为mock IP,IP产物即是以实验抗体获得的免疫沉淀产物。


在后续的qPCR检测中,通常将IgG产物组作为IP产物组的对照。如需设置阳性对照抗体,可以选择Histone H3或者RNA polymerase II,然后以GAPDH或Actin等作为检测基因。


在后续的Sequence中,通常将Input组产物作为测序对照样品。

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