在众多科研实验中，养细胞是所有实验的基础，肿瘤细胞培养过程中，总会遇到各种问题。辉骏生物列举以下几种情况，并提供了一些解决方法供大家参考。

【研究内容】：2021年8月，西南大学家蚕基因组学国家重点实验室发表新研究成果。本研究聚焦调控丝素蛋白（fibH、fibL、P25)编码基因的启动子结合蛋白，利用DNA pull down MS技术筛选了幼虫第四次蜕皮期 (M4)和5龄幼虫第5天(L5D5)这两个具有代表性的发育阶段，从后丝腺中鉴定出大量fih、fibL和P25启动子的结合蛋白，并分析了M4和L5D5之间存在共同和独特结合蛋白，及它们的功能特征和相互作用关系，为了解丝蛋白基因的相关调节因子提供了新的见解。

【研究内容】：2017年7月，中国农业科学院兰州兽医研究所基于iTRAQ差异蛋白质组学技术比较了蛋白质在弓形虫三种生命周期形式(卵囊、速殖子和含缓殖子的包囊)中的丰度，研究结果揭示了这种寄生虫在三个生活周期阶段的蛋白质表达的差异，为了解这些生活周期形式对其栖息地的适应机制提供了新的见解。

RNA 正在迅速成为一种非常有吸引力的载体，用于递送疫苗和其他疗法。 了解如何最大限度地提高 RNA 治疗效率是一个主要的研究领域

辉骏生物可做PCR实验。聚合酶链式反应 (PCR) 是一种允许在实验室中使用现成的试剂对一段 DNA 进行多次拷贝的技术。在反应过程中，拷贝数呈指数增加。 因此，可以在几个小时内制作超过 1000 亿份 DNA 片段。 DNA聚合酶和合成寡核苷酸的可用性使这项技术成为可能。PCR 现在已成为克隆的替代方法，因为它允许扩增复杂混合物中的特定序列。此外，PCR 结合测序技术可以特异性、快速和高灵敏度地鉴定 DNA 样品中的突变等位基因。

从头测序 是一种分析和鉴定肽序列和一些翻译后修饰蛋白的方法。 与其他一些分析方法依赖于已知的蛋白质序列数据库或已知的质谱数据库不同，de novo 测序使用串联质谱法根据肽段的断裂特征进行直接分析。 因此，蛋白质数据库中未包含的肽序列、新物种的蛋白质序列和基因组尚未测序的蛋白质序列都可以进行分析。 该方法开发的软件包括 PepNovo、PEAKS 和 pNovo。

辉骏生物-蛋白质磷酸化对于调节蛋白质结构、蛋白质定位和蛋白质-蛋白质相互作用至关重要，这些相互作用构成了许多细胞信号网络的基础。 基于磷酸化的信号传导通常采用级联的形式，其中连续的蛋白质磷酸化导致蛋白质稳定性、功能和定位的变化。

辉骏生物-提供His标签蛋白表达但不结合Ni-NTA色谱柱方法如下，可以从以下3点着手：1.您的增溶缓冲液是否需要优化？2.您的亲和树脂新鲜有效吗？ 3.您的蛋白质是否隐藏了组氨酸标签？

自下而上和自上而下是两种基于生物量光谱法的蛋白质组学分析方法。 自下而上，也称为霰弹枪，是蛋白质组学研究中广泛使用的质谱技术，是一种将大蛋白质片段消化/酶促溶解成小肽进行分析的传统方法。 自上而下可以直接对完整蛋白质进行测序，包括翻译后修饰的蛋白质和其他大片段蛋白质，而不仅仅是肽。

有些物种的数据库质量不好，包含的蛋白数目过少，这种可以考虑换大一级的物种分类数据库，或者选择在进化树上同源性较近的、研究比较清楚的、基因组数据库相对完整的模式物种的数据库重新查库。

PCR反应条件的选择技巧主要体现在温度、时间和循环次数上，温度过高，延伸时间不够都会对实验结果有很大的影响，辉骏生物总结了以下几点关于PCR反应条件的选择技巧及优化方法。

选择“正确”标签可能是一项艰巨的任务。理想的标签将帮助你获得可溶性蛋白，简化你的纯化方案，并且不会干扰下游应用。