中文标题：MAP3K1突变赋予HR⁺/HER2^-乳腺癌的肿瘤免疫异质性

发表期刊：Journal of Clinical Investigation

中科院分区：1区

影响因子：13.3

发表时间：2024年11月

合作单位：复旦大学附属肿瘤医院

运用技术：RIP试剂盒（货号：FI8709）（由辉骏生物提供产品和技术支持）

【研究概述】：

        HR⁺/HER2^-（激素受体阳性/人表皮生长因子受体2阴性）乳腺癌是最常见乳腺癌类型，其免疫疗法研究尚处早期阶段。研究者发现HR⁺/HER2^-乳腺癌具有高度异质性的肿瘤免疫微环境，且与MAP3K1（有丝分裂原激活蛋白激酶激酶1）突变相关，MAP3K1突变可减弱CD8⁺ T细胞介导的抗肿瘤免疫。

机制研究表明：MAP3K1突变促进了TAP1/2(抗原肽转运蛋白1/2) mRNA降解，进而抑制MHC-I介导的肿瘤抗原呈递，驱动肿瘤免疫逃逸。在临床前模型中，酪胺可逆转MAP3K1突变诱导的MHC-I减少，增强免疫治疗疗效。

该研究揭示了驱动HR⁺/HER2^-乳腺癌免疫异质性的重要生物标志物MAP3K1，并阐明了其分子机制，这为利用酪胺增强免疫治疗疗效的新策略提供了依据。

辉骏生物RIP试剂盒（货号：FI8709），有幸助该研究一臂之力。

【研究内容】：

1. 体内和体外实验证实：MAP3K1基因与HR+/HER2-乳腺癌免疫异质性密切相关，MAP3K1突变（MAP3K1-mut）的肿瘤细胞能抑制CD8⁺  T细胞介导的免疫。

2. RNA-seq等实验发现MAP3K1-mut肿瘤中的MHC-I抗原呈递通路显著下调，TAP1和TAP2是其中的关键基因，过表达Tap 1/2可以有效地挽救肿瘤细胞表面MHC-I表达的下调。

3. RT-qPCR实验表明MAP3K1-mut在转录后水平抑制Tap 1/2表达，因MEKK1并非RNA结合蛋白（RBP），猜测可能有另外一种分子使Tap 1/2 mRNA不稳定，故通过RNA pull-down与IP实验筛选可结合Tap1/2 mRNA且与MEKK1互作的RBP。

4. 接下来分析两项检测的蛋白交集，锁定RNA代谢相关的DDX17（DEAD盒解旋酶17）；通过RNA下拉实验表明Tap1/2 RNA与DDX17直接结合，且免疫共沉淀（Co-IP）结果显示Map3k1-Mut与DDX17结合减少。使用辉骏生物“RIP试剂盒”进行RIP（RNA免疫沉淀）实验，发现MAP3K1-mut显著增加了DDX17与Tap1/2 mRNA的结合（图1E）。支持“Map3k1-WT 结合DDX17可抑制其降解“Tap1/2 mRNA”的推测。

5. 通过siRNA（siDdx17）挽救实验、免疫荧光等进一步确认：MEKK1突变抑制其与DDX17的结合，促进DDX17介导的Tap1/2 mRNA降解。

6. 鉴于MAP3K1-mut可下调MHC-I重塑免疫微环境、促进肿瘤生长，且酪胺（Tyra）临床转化潜力大，研究者将其应用于体外共培养系统，发现Tyra可逆转MAP3K1-mut肿瘤细胞表面MHC-I及OVA抗原下调，增强CD8⁺ T细胞活化。

7. 小鼠模型实验显示：单独抗PD-1治疗抑瘤效果有限，而Tyra联合抗PD-1治疗可强效抑制肿瘤生长，且该联合方案能显著提升肿瘤组织CD8+ T细胞浸润与活化。

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