TMT实验原理：

Tandem Mass Tag™ (TMT™) 是由美国Thermo公司研发的体外同重同位素标记的定量技术的专利产品，用于标记不同的蛋白样品并同时进行高通量的 LC-MS/MS 的定量研究 。目前有 2-、6-、10- 等 3种通量类型，可分别平行处理 2个、6个和 10个样品，显著提高了蛋白样品质谱检测的通量，减少所需质谱机时；此外，由于采用了稳定同位素标记不同样品，在标记实验之后所有样品混合成一个进行后续处理，大大降低了实验误差，使得定量准确性显著提高。

TMT同位素试剂标记多肽氨基基团后，等量混匀多肽并进行LC-MS/MS分析。一级质谱中，不同样品来源的同一肽段表现出相同的m/Z；二级质谱中，化学键断裂释放出报告离子，低质量区的报告离子强度反映了该肽段在不同样品中的相对表达量，高质量区的肽段碎片离子m/Z反映了该肽段的序列信息。质谱原始数据经过数据库检索，即可得到样本中所含蛋白及其表达差异。

TMT标记定量实验流程：

2-、6-、10-个样品分别提取总蛋白，取等量蛋白进行 Trypsin 酶切，得到相应样品的多肽；分别用不同的 TMT 标签对 2-、6-、10- 个样品进行标记，随后等量混合成一个样品并进行LC-MS/MS 分析和后续的数据库比对，鉴定出样品中含有哪些蛋白以及每个蛋白在样品中相对含量。

图1：辉骏生物TMT标记定量蛋白质组学实验流程图

辉骏生物TMT技术服务优势

TMT应用领域

基础医学：疾病标志物，发病机制，疾病分型等；

生物医药：药物机理，药效评价，药物开发等；

农林畜渔：抗逆胁迫，生长发育，耐药，致病机理等。

TMT服务信息-辉骏生物

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TMT标记定量—辉骏生物客户发表文献

1. Li K. et al: Tyrosine kinase Fyn promotes osteoarthritis by activating the β-catenin pathway. Ann Rheum Dis, 0:1–9 (2018，IF=14.299).

2. Global iTRAQ-based proteomic profiling of Toxoplasma gondii oocysts during sporulation. J Proteomics.(2016 , IF=5.168).

4. Zeng L. et al: Asparagine Synthetase and Filamin A Have Different Roles in Ovarian Cancer. Front Oncol. (2019，IF=4.848).

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