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怎样对合成DNA/RNA制品进行定量、如何测定并计算OD值?

由于核酸在260 nm附近有强吸收,因此常根据此性质,用紫外分光光度计测定核酸溶液在260 nm的吸光度值,据此对核酸进行定量,用OD值来表示。1 OD是指:置于光路长度为1 cm的比色皿中的DNA/RNA溶液,如果其在260 nm处的吸光度值为1,则称1 ml该溶液中溶解的DNA/RNA的量为1 OD。1个OD值的合成DNA/RNA的质量约为33 μg。将DNA/RNA溶液进行适当稀释,使吸光度测定值与样品浓度的关系在直线范围内,再根据原溶液的总体积与稀释倍数计算该溶液的总OD值。例如,一个200 μl的DNA/RNA溶液,如果对其进行6倍稀释,测定值为1.0时,则该溶液的总OD值为:0.2 ml×6×1.0 OD/ml=1.2 OD 。

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