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PCR扩增不出是引物有问题吗?

基本不是。当今发展出各色各样的PCR扩增技术,各色各样的高温聚合酶,就是来解决PCR扩增中遇到的扩不出,扩增效率低的问题。如槽式PCR就是扩增那些拷贝数很低的基因片段。 有些重复片段的扩增, GC含量高的片段,非要采用特殊扩增手段才能扩增出了。


引物扩增不出,主要是下列两种情况比较常见:
RT-PCR:注意,很多基因通过常规RT–PCR方法是很难不增出来的。RT- PCR成功的关键在于RT的反应的RNA质量和目标基因在特定组织和细胞中含量。
从基因组中扩增:一般情况下,基因在基因组中都是单拷贝,基因组作为模板需要严格控制用量。基因组DNA过高,会影响反应体系中的Mg和pH。

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