RNA pull down银染后条带背景深需考虑是不是SDS-PAGE染色时间过长或者抗体的质量问题,多克隆抗体经常会出现这种情况,最有可能的情况是样品中包含的非特异性蛋白太多了,针对这一点,有以下解决措施:
1.优化孵育时间、温度、盐浓度等条件;
2.优化缓冲体系,使用严谨性高的缓冲体系;
3.提高裂解液的质量。
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