做Co-IP实验总踩坑？背景脏到看不清条带、辛苦捕获的目标条带莫名消失？其实关键症结就藏在磁珠清洗步骤里！

不用再反复调试实验参数、纠结清洗细节，辉骏生物直接上视频实操，1分钟手把手教会你Co-IP磁珠清洗全流程——每一步操作清晰拆解，动作要领精准标注，新手也能跟着镜头一步步做，轻松搞定清洗难题，杜绝背景污染、目标条带丢失，让实验一次出好结果！

实验必记小Tips，速存备用！

1️⃣ 漂洗缓冲液提前预冷至4℃，实验全程冰上/4℃环境操作，有效防止蛋白降解；

2️⃣ 加入缓冲液后轻柔颠倒混匀，严禁剧烈涡旋，保护磁珠完整性，避免影响蛋白结合；

3️⃣ 严格遵循“磁吸-弃上清-加液”标准流程，确保磁珠完全吸附，不造成样本损耗；

4️⃣ 规范清洗3次，最后一轮务必吸净上清，最大程度降低实验干扰；

5️⃣ 每次清洗时长控制在1分钟，平衡清洗效果与蛋白结合稳定性，避免结合丢失；

6️⃣ 按需调整缓冲液盐浓度，高盐环境可有效减少非特异性结合，降低实验背景。

辉骏生物提供的Co-IP免疫共沉淀服务分为以下两种：

1. Co-IP WB，用于检测某样本中的诱饵蛋白和待测蛋白是否存在相互作用；

2. Co-IP MS，用于筛选某样本中的诱饵蛋白与哪些蛋白具有相互作用。

加技术专员微信了解Co-IP实验服务排期、优惠等

18927549347、13430303037

CoIP实验技术服务样本要求

1. 送样量要求

▲注意：表列出的均为每组样本的送样量，如果实验和对照组用的样本一致，此样本量*2。详细送样指南联系辉骏生物客服或销售索取

免疫共沉淀CoIP实验服务—辉骏生物客户文章

1. Li H.B. et al: The plant ESCRT component FREE1 shuttles to the nucleus to attenuate abscisic acid signaling. Nature Plants. 2019，IF=17.352. 【研究内容】：客户发现，作为内体蛋白分选转运复合体成分之一的FREE1基因，受到脱落酸刺激时候会发生磷酸化并移位到细胞核。客户利用酵母双杂交技术找到两个核蛋白ABF4 and ABI5会与FREE1结合，免疫共沉淀CoIP实验进一步证实了FREE与这两个蛋白的互作。后续实验表明，FREE1通过抑制ABF4、ABI5对下游基因的调控能力，参与了脱落酸信号通路。 使用相关技术：质谱鉴定、免疫共沉淀CoIP、Co-IP MS实验

2. Jiang, S. et al: Cholesterol Induces Epithelial-to-Mesenchymal Transition of Prostate Cancer Cells by Suppressing Degradation of EGFR through APMAP. Cancer Research.2019，IF= 13.312. 【研究内容】：客户利用蛋白质组学技术，筛选出胆固醇致前列腺癌发生上皮间质转变（EMT）的重要基因APMAP和EGFR。通过在前列腺癌细胞表达3*Flag-APMAP基因，并利用免疫共沉淀CoIP及质谱鉴定技术，客户发现EPS15R可与APMAP结合。进一步的研究证实，体内EPS15R-APMAP复合物通过EGFR致使细胞发生EMT。 使用相关技术：蛋白质组学、质谱鉴定、免疫共沉淀CoIP

3. Huang C.Y. et al: UBAP2L arginine methylation by PRMT1 modulates stress granule assembly. Cell Death Differ. 2020 , IF=12.067. 【研究内容】：前期研究表明UBAP2L蛋白参与应激颗粒形成。客户在这项研究中，用免疫共沉淀结合质谱等技术，发现PRMT1甲基化UBAP2L，UBAP2L蛋白并且和另外三个应激颗粒形成有关的重要蛋白有相互作用。这些蛋白复合物介导了应激颗粒的形成。 使用相关技术：CoIP技术服务、质谱鉴定、修饰位点鉴定