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一抗和二抗有什么区别?

抗体(或免疫球蛋白)是 糖蛋白 免疫系统响应“外来”物质即抗原微生物上存在的 每种抗体都是独特的,并且对特定类型的抗原具有特异性, 它会与其同源抗原结合并中和感染过程中微生物产生的毒素。 抗体存在于血浆、血清、唾液和眼泪等体液中——事实上,它们约占血浆中蛋白质的 20%。 经常产生抗体用于研究。 它们根据其结合能力和用途分为初级和次级。


抗体结构

一抗和二抗具有共同的结构。  抗体是 Y 形分子,具有 3 个大小大致相等的三个部分。  它们由两条相同的轻链和两条相同的重链组成——二硫键将两条重链连接在一起,每条重链连接到一条轻链。   这些链的特定结构和组合使抗体分子可以同时与多个细胞结合。  抗体分子的不同部分可以结合多种抗原,也可以结合一些效应分子。   抗体的可变区或V区表示/指Y结构的两个臂,该区域可以与抗原结合。  相比之下,Y 结构的茎被称为恒定区或 C 区,它只能与有限数量的效应细胞和分子结合。


一抗和二抗

一抗

可以与特定蛋白质或感兴趣的生物分子结合的抗体称为一抗。   以大鼠、小鼠、山羊和兔等动物为宿主,以单克隆抗体 (mAb) 或多克隆抗体 (pAb) 的形式生产一抗。  MAb 或 pAb 各有优缺点,在选择一抗之前需要考虑这些优缺点。  MAb 由动物的单个 B 细胞克隆产生,因此仅针对抗原的一个表位。  PAb 由动物的多个 B 细胞克隆产生,并具有针对抗原的几个表位的抗体的异质混合物。  MAb 非常适合相同的生产和标准化实验,并且产生的背景染色最少或不产生背景染色。  在使用 mAb 时,与不需要的蛋白质发生交叉反应的可能性也降低了。


由于 pAb 可以结合单一抗原的多个表位,因此它们能够识别抗原中的微小变化。  它们还产生更强的抗原检测信号。  因此,它们非常适合涉及变性蛋白质的实验。   一抗以不同的粗制和纯化形式开发和供应。  它们可用于检测糖尿病、癌症、阿尔茨海默病和帕金森病的生物标志物。


二抗

二抗与直接附着于靶抗原的一抗结合。  一抗的 V 区与抗原结合后,标记的二抗将其 V 区连接到一抗的茎或 C 区。  利用这种相互作用,二抗可以间接帮助检测和纯化目标蛋白(抗原)。   二抗在标记和检测方面更加灵敏和灵活——因此,它们在流式细胞术、蛋白质印迹和细胞成像等一系列应用中用于一抗的比色、化学发光和荧光检测。


二抗类型的选择基于一抗的类别 - 免疫球蛋白 IgG 或 IgM、首选标签类型和来源宿主。  由于大多数一抗是使用少数宿主物种开发的,并且大多数一抗属于 IgG 类,因此制造商通常提供可用于许多不同检测程序和系统的即用型二抗。  常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗鸡 IgG 或抗山羊 IgG。 所选择的二抗应始终能够识别产生一抗的宿主物种,例如,为了检测从小鼠产生的一抗,使用抗小鼠二抗。  特定检测的最佳二抗也取决于标签类型。  在 ELISA 和蛋白质印迹中,标记通常是化学发光、比色或基于荧光的,但在流式细胞术和免疫荧光中,仅使用荧光标记。   偶联二抗将是所有这些测定的理想选择。



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