中文标题：WTAP介导的m6A修饰稳定PDIA3P1，并促进组蛋白乳酸化诱导的食管鳞癌肿瘤发展

发表期刊： Advanced Science

中科院分区：1区

影响因子：14.1

发表时间：2025年6月

合作单位：皖南医学院第一附属医院

运用产品：生物素RNA pull-down试剂盒和F2-RNA pull-down试剂盒（由辉骏生物提供产品和技术支持）

【研究概述】：

        2025年6月，皖南医学院第一附属医院的研究人员使用辉骏生物生物素RNA pull-down试剂盒和F2-RNA pull down试剂盒发表文章，该研究发现lncRNA“PDIA3P1”在食管鳞状细胞癌（ESCC）中高表达，通过调节糖酵解产生更多的乳酸，上调乳酸化水平以驱动肿瘤进展。机制研究表明，lncRNA PDIA3P1通过与miR-152-3p竞争结合，阻止GLUT1 mRNA的降解来增强其水平，并破坏MARCH8（膜相关的RING-CH8）和HK2（己糖激酶2）之间的结合，以减少HK2的泛素化降解，促进糖酵解。PDIA3P1还上调了组蛋白H4K8乳酰化（H4K81a）的水平并促进BMP7（骨形态发生蛋白7）转录，最终推动ESCC进展。此外，Wilms肿瘤1相关蛋白（WTAP）介导的m6A修饰通过IGF2BP1（胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1）依赖性识别增强了PDIA3P1的稳定性。这些发现揭示了PDIA3P1对糖酵解-H4K81a-BMP7信号轴的调控在ESCC进展中的关键作用，并为代谢重编程和表观遗传调控之间的相互作用提供了新的见解。

【研究内容】：

1. 研究发现lncRNA“PDIA3P1”在ESCC组织及细胞系中高表达。RNA-seq结果揭示其与糖酵解相关。

2. 生物信息学分析了靶向PDIA3P1的5种miRNA，AGO2蛋白的RIP-qPCR实验证实miR-152-3p的富集最为显著，研究者使用辉骏生物“生物素RNA pull-down试剂盒”进行miRNA pull-down实验，发现PDIA3P1可以结合miR-152-3p（图1K）。

3. 进一步发现PDIA3P1敲低显著下调了糖酵解关键酶：葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）和己糖激酶2（HK2）的蛋白水平，且二者是PDIA3P1的下游靶点。

4. 机制解析表明，一方面，PDIA3P1通过结合miR-152-3p，减少其对GLUT1 mRNA的降解，从而维持GLUT1的稳定性和表达水平。另一方面，PDIA3P1直接结合HK2，阻断E3泛素连接酶MARCH8对HK2的泛素化降解，提高其蛋白稳定性。这两方面共同激活了糖酵解关键节点，加速了乳酸的积累。

5. CUT&Tag和RNA-seq实验筛选出了H4K8la的潜在靶基因BMP7（骨形态发生蛋白7），功能验证实验发现，BMP7是PDIA3P1驱动ESCC进展的下游靶点，调控ESCC的肿瘤进展；

6. 此前研究发现其他癌症中PDIA3P1出现了大量的m6A富集峰；SRAMP预测、MeRIP-qPCR显示、TCGA数据库分析、qRT-PCR实验发现PDIA3P1在ESCC中存在显著的m6A修饰，并且其表达水平与m6A甲基转移酶WTAP呈正相关；

7. 研究者使用辉骏生物“F2-RNA pull down试剂盒”证实，PDIA3P1与WTAP之间存在直接相互作用(图2H,I），WTAP通过m6A修饰调控PDIA3P1的RNA稳定性，且m6A阅读器IGF2BP1是稳定PDIA3P1的关键因子，WTAP/IGF2BP1依赖的m6A修饰是PDIA3P1高表达的关键机制。

【研究结论】：

综上所述，本研究揭示了PDIA3P1在ESCC中作为代谢-表观调控枢纽的重要功能：一方面通过ceRNA机制和蛋白互作增强糖酵解，诱导乳酸依赖的组蛋白乳酰化，促进BMP7转录；另一方面通过WTAP/IGF2BP1介导的m6A修饰维持自身稳定性和表达水平。这一发现不仅拓展了对ESCC发病机制的认识，也为靶向代谢重编程与表观修饰的联合治疗策略提供了新靶点。

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